Identificación de genes pluripotenciales en el pez medaka

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Cultivos de células madres puede derivar directamente de embriones de desarrollo temprano e indirectamentea partir de células diferenciadas por la expresión forzada de factores de transcripción pluriponciales. Genes pluripotenciales se utilizan habitualmente para caracterizar cultivos de células madres de mamíferos a nivel molecular. Sin embrago, dichos genes se han desconocen en vertebrados inferiores. En este sentido, el pez medaka de laboratorio es especialmente adecuado porque tiene células madres embrionarias (ES) y datos de secuencia genómica. Por investigación de homología y expresión in vivo y en vitro se identificaron siete genes de pluripontecialidad en medaka. Mediante el análisis de RT-PCR, los siete genes se dividen en tres grupos de patrón de expresión. El grupo I incluye a nanog y oct4 que muestra expresión gonadal específica; el grupo II contiene sall4 y zfp281 mostrando expresión gonadal preferenciales; el grupo III tiene a klf4, ronina y tcf3 exhibiendo también expresión en varios tejidos somáticos, aparte de las gónadas. Las transcripciones de los siete genes son sumistrados maternalmente y persisten en un alto nivel durante la embriogénesis temprana. Se hizo uso de embriones en desarrollo temprano y gónadas de adultos para examinar la expresión en las células madres y derivados diferenciados por hibridación in situ. Sorprendentemente, nanog y oct4 son latamente expresados en blastómeros pluripontes de embriones de 16 células. En el testículo adulto, expresión de nanog fue específico a espermatogonia, las células madres germinales, donde tcf3 la expresión se produjo en células diferenciadas y espermatogonia. Lo más importante, todos, los siete genes son marcadores pluriponciales in vitro, ya que tienen alta expresión en células madre embrionarias no diferenciadas, pero dramáticamente baja regulación en la diferenciación. Por lo tanto, estos genes han conservado su expresión pluriponcial-específica in vitro desde mamíferos hasta vertebrados inferiores.