Caraterización molecular y patrón de expresión de tres genes de la zona pelucida en esturion chino (Acipenser sinensis)

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Esturión chino (Acipenser sinensis) es una especie en peligro de extinción y también un recurso importante para la industria de la acuicultura. cDNA de longitud completa de tres genes de la glicoproteína de la zona pelucida fueron clonados y secuenciados. Los nuevos genes fueron denominados AsZP3.1, AsZP3.2, and AsZP3.3. Presentaron 1,388 pares de base (bp), 1,288 y 1,290 bp en longitud respectivamente y que podría traducirse en proteínas con 440, 394, y 398 aminoácidos, respectivamente.

Análisis de RT-PCR indicaron que AsZP3.1 mostraron una amplia distribución tisular en los niveles de mRNA incluyendo el hígado, riñón, bazo, corazón, y el ovario, pero ARNm de AsZP3.2 AsZP3.3 se expresa exclusivamente en la gónada.
Los tres mRNAs de AsZP3 no se detectaron durante la embriogénesis y el desarrollo larval y, además, no se detectaron en las gónadas de 1 y 2 años de edad en los esturiones chinos. Los tres mRNAs de AsZP3 se detectaron en los testículos de los machos de 3 años de edad y en los ovarios, de 4 y 5 años de edad, los esturiones chinos de hembra.

Trucha arcoiris posee dos mRNA de hormona sensible a lipase que se expresan diferencialmente y son reguladas independientemente por el estado nutricio

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Peces teleósteos almacenan lípidos en varios tejidos como triacilglicerol (TG). Durante la demanda metabólica, TGs almacenados son hidrolizados por la hormona sensible a lipasa (HSL). En este estudio, fueron aislados dos distintos cDNA que codifican HSL, clonadas y secuenciadas desde tejido adiposo en trucha arcoíris. La longitud total de los cDNAs, designadas como HSL1 y HSL2, fue de 2562 y 2887 pares de base en longitud respectivamente y comparten un 82% de identidad nucleotídica.
Análisis filogenético sugiere que las dos HSLs derivan de genes parálogos que pueden haber surgido durante un evento de duplicación específica del genoma de teleósteos. PCR cuantitativa en tiempo real, reveló que el HSL1 y HSL2 son expresados diferencialmente, tanto en términos de distribución entre los tejidos, así como en términos de abundancia en los tejidos seleccionados juveniles de trucha.

Dimorfismo sexual en la expresión y actividad de la aromatasa en cebrero de poblaciones de trucha monosexo

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Los resultados indican que la expresión y actividad de la aromatasa del cerebro mostro un claro y significante patrón de dimorfismo sexual con mayores niveles en el cerebro de macho entre 35 y 53 días post fecundación (dpf) antes del tiempo de la diferenciación morfológica de las gónadas .
La expresión de una enzima clave que participan en la conversión de colesterol en los esteroides, el cyp11a1 (p450scc), así como los receptores de estrógenos también presentan dimorfismo sexual. El dimorfismo se perdió desde 56 dpf hacia adelante. Factores de transcripción tales como nr5a1b (sf1) y nrob1 (dax1) pero no oxl2a fue también mayor en machos que en hembras.

Estos resultados demuestran que, antes o durante el período inicial de la diferenciación gonadal morfológica, el cerebro presenta un claro dimorfismo sexual con respecto a la expresión y actividad de la aromatasa, así como de ciertas enzimas y factores que intervienen en la síntesis de esteroides como p450scc y sf1. Los resultados sugieren una mayor potencialidad para producir estrógenos por los cerebros de machos durante el tiempo de la diferenciación sexual.

Clonación y secuenciación de un homólogo vasa en la lubina (Dicentrarchus labrax): Distribuión deTejido y niveles de expresión de ARNm durante el desa

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Vasa es una proteína expresada principalmente en las células germinales y es conservada a través de los taxones. Sin embargo, las diferencias relacionadas con el sexo y las influencias ambientales sobre la expresión de vasa no se han documentado. Este estudio caracteriza el cDNA de un homólogo vasa en la lubina, Dicentrarchuslabrax, (sb-vasa), un pez gonocórico con influencias de la temperatura en gonadogenesis. El marco de lectura abierta de 1911 pb predijo una proteína de 637 amino ácidos con los ocho dominios conservados típica de las proteínas de Vasa. Las comparaciones de la secuencia de aminoácidos deducida con los de otros vertebrados e invertebrados revelaron la más alta homología (68-85%) con los de otros teleósteos. Vasa de lubina fue altamente expresado en las gónadas con poca o ninguna expresión en otros tejidos. Cuantificación en tiempo real ( RT-PCR) de la expresión temporal de sb-vasa desde desarrollo temprano a través de la diferenciación sexual mostró que los niveles de mRNA fueron altos en los huevos no fertilizados, disminuyó durante el desarrollo larvario y aumentó de nuevo durante el período de la proliferación de células germinales. La cría de peces en alta temperatura provocó un aumento mayor de los niveles de sb-vasa, reflejando probablemente el efecto de la temperatura sobre el crecimiento somático y gonadal.

Caraterización de secuencias y análisis filogenético de 5S ADN ribosomal en las especies de la familia Batrachoididae

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Secuencias de 5S ADN ribosomal (ADNr) fueron analizadas en cuatro especies pertenecientes a géneros diferentes de la familia de los peces Batrachoididae. Varias variantes de 5S ADNr en sus diferentes espaciadores no transcritos (NTSs) se encontraron y fueron agrupados en dos tipos principales. Dos especies mostraron dos tipos de 5S ADNr, mientras que las otras dos especies mostraron un solo tipo. Un tipo de NTS de Amphichthys cryptocentrus mostró un polimorfismo elevado debido a varia deleciones e inserciones, y el análisis filogenético mostro agrupaciones entre-especies de este tipo de NTS en Amphichthys cryptocentrus. Estos resultados sugieren una clara diferenciación en el modelo de la evolución 5S ADNr de estas cuatro especies de Batrachoididae, que parecen haber sido objeto de procesos de evolución concertada.

El cortisol está involucrado en la determinación del sexo dependiente de la temperatura en el lenguado japonés.

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En los vertebrados, el sexo se determina normalmente por el genotipo. Sin embargo, en los vertebrados poiquilotermos, incluyendo reptiles, anfibios y peces, la determinación del sexo está muy influenciado por factores ambientales, tales como la temperatura. El lenguado japones (Paralichthys olivaceus) es un pez teleósteo con un sistema de determinación de sexo XX / XY.

Sin embargo, el lenguado XX puede ser inducido a convertirse predominantemente, ya sea a hembras o machos fenotipicamente, por cría a 18 o 27 °C, respectivamente. Investigadores, han demostrado que el cortisol provoca el cambio de sexo de hembra a macho por la supresión directamente de la expresión del ARNm de cyp19a1 a través de la interferencia con la activación mediada por el AMPc y que metirapona (un inhibidor de la síntesis de cortisol) inhibe a 27 °C la inducida masculinización del lenguado XX. Por otra parte, las concentraciones de cortisol en juveniles críados a 27°C fueron significativamente mayores que los peces críados a 18° durante la diferenciación sexual. Estos resultados sugieren fuertemente que la masculinización por alta temperatura del agua es atribuible a la elevación de la concentración de cortisol durante la diferenciación del sexo gonadal en el lenguado.

Clonamiento molecular, análisis de expresión y caracterización del gen adenilosuccinato liasa de carpa hervibora(Ctenopharyngodon idella)

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Adenilosuccinato liasa (ADSL) es una enzima bifuncional que actúan en la síntesis de novo de purinas y el reciclado de nucleótidos de purina. Investigadores construyeron una biblioteca de cDNA de instetino de la carpa hervibora (Ctenophryngodon idella). La secuencia completa del cDNA, contiene un marco abierto de lectura de 1.446 pb codificando 482 aminoácidos.La secuencia de aminoacidos deducida comparte una lata homología con su contraparte de vertebrados, comparte 94% de similitud con el pez cebra, el 81% con rana africana, así como el pollo, el 77% con humanos y el 76% con el ratón. Esta secuencia genómica ADSL de carpa hervibora esta formado por 13 exones y 12 intrones y presenta 8.557 bp. Análisis cuantitativo de PCR en tiempo real reveló que la expresión más alta de nivel de ADSL de carpa hervibora se detectó en el músculo y la menor cantidad en agalla.